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鲁米诺 Luminol
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【中文名】:鲁米诺/3-氨基苯二甲酰肼/发光氨 【英文名】:3-Aminophthalhydrazide 【CAS#】:521-31-3 【分子量】:177.16 【分子式】:C8H7N3O2 【结构式】: 【存储条件】:2-5℃,密封,避光防潮 【化学性质】:易溶于碱液,能溶于稀酸,几乎不溶于水,难溶于醇。 中性或淡酸性溶液暴露在紫外光中时显强烈的亮蓝色 【用途】化学发光试剂,常用于化学发光免疫分析,如金属阳离子和血液检测。 【发光率检测】最适荧光波长为425nm(在60mMK2S2O8,100mK2CO3,PH11.5溶液中检测化学发光率)。
简介: 鲁米诺/发光氨/Luminol因其结构简单、易合成,水溶性好,以及发光量子效率高等特点,鲁米诺是最常用的液相化学发光试剂之一。自从1928年Albrecht首次报道了鲁米诺与氧化剂在碱性溶液中的化学发光反应以来,人们对该化学发光体系的研究就一直十分活跃,使得该化学发光体系被应用于许多领域之中。
鲁米诺发光原理以及它的检测方法: 鲁米诺(luminol),又名发光氨,它常温下是一种黄色晶体或者米黄色粉末,是一种比较稳定的化学试剂。同时,鲁米诺又是一种强酸,对眼睛、皮肤、呼吸道有一定刺激作用。 它是一种最古老的和最常用的试剂,在碱性条件下可被过氧化物氧化,同时发光,鲁米诺和过氧化物之间的氧化还原反应需要催化剂,这种催化剂一般为多价金属离子、过氧化物酶如铁、辣根过氧化物酶等,此种方法常用于检测过氧化物、重金属、过氧化物酶的含量,以及由此衍生的检测自由基、进行毒物分析和基于过氧化物酶和葡萄糖氧化酶的分析方法。 在通常情况下与过氧化氢在某些催化剂存在时化学发光反应非常迅速。最常用催化剂是金属离子,在很大浓度范围内,金属离子浓度与发光强度成正比,从而可进行某些金属离子的化学发光分析,利用这一反应可以分析那些含有金属离子的有机化合物,达到很高的灵敏度。其次是利用有机化合物对鲁米诺化学发光反应的抑制作用,测定对化学发光反应具有猝灭作用的有机化合物。其三是通过偶合反应间接测定无机或有机化合物。 鲁米诺发光原理 一是次氯酸钠氧化鲁米诺使其发光; 二是过氧化氢与次氯酸钠反应生成氧气氧化鲁米诺使其发光: 首先是次氯酸钠和过氧化氢反应的方程式:NaClO+ H2O2 == NaCl + O2 + H2O 其次,鲁米诺与氢氧化物反应时生成了一个双负离子(Dianion),它可被过氧化氢分解出的氧气氧化,产物为一个有机过氧化物。该过氧化物很不稳定,立即分解出氮气(鲁米诺被有机氧化剂如二甲基亚砜氧化后不是生成氮气,而是生成含氮有机物),生成激发态的3-氨基邻苯二甲酸。激发态至基态转化中,释放的能量以光子的形式存在,波长位于可见光的蓝光部分。 鲁米诺(发光氨)作为化学发光试剂常用于检测之中,不过,有些人会问,鲁米诺在应用的时候一般会选择哪些发光检测的方法呢?一般来说,分别为催化剂加快发光,抑制剂间接测定,通过偶合间接测定。 催化剂加快发光方法估计都明白,鲁米诺发光检测发光速度太慢,所以在检测中常要加入一些催化剂来加速。在化学发光免疫分析中我们会经常用到的催化剂是过氧化物,特别是辣根过氧化物酶,而除了辣根酶,催化剂还包括一些金属配合物、过渡金属离子,比如血红蛋白、铁离子、锰离子等。 有加速就有抑制,有些有机物会抑制剂来抑制鲁米诺的发光,如含有酚羟基团的还原性化合物,那就可以利用这点对此类有机物进行间接测定,这便是第二种测定方法。 通过偶合间接测定的方法是指将能够产生或者消耗化学发光反应物的一个反应与另一个化学发光反应结合起来,从而可以实现某些物质的间接化学发光测定。在测定某些底物酶的纯度的时候会用到此方法。
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